FISH test

Z FISH test je mikroskopický chromozomový test při prenatální a karcinomové diagnostice karcinomu prsu, rakoviny žaludku a chronické lymfocytární leukémie. Test, jehož výsledek je k dispozici během 1 až 2 dnů, může primárně detekovat chromozomální abnormality, které lze vysledovat zpět ke změněné sadě chromozomů v určitých chromozomech. Zkouška se provádí pouze jako doprovodný nebo předběžný test pro podrobnou analýzu chromozomů, jejichž výsledky jsou k dispozici pouze 2 až 3 týdny po odstranění buněk.

Co je test FISH?

Test FISH (Fluorescenční in situ hybridizace) v prenatální diagnostice umožňuje vyvodit závěry o změněné sadě chromozomů pro určité chromozomy. K provedení testu FISH je zapotřebí nejméně 50 nekultivovaných plodových plodů (buněk amnií), které se odebírají z plodové vody (přibližně 2–3 ml). Alternativní metoda pro získání vhodných buněk je odběr choriových klků, při kterém jsou buňky odebírány z oblasti připojení pupečníkové tkáně biopsií.

Speciální postup umožňuje, aby jednotlivé řetězce chromozomů 13, 18, 21 a chromozomy X a Y byly od sebe odlišeny fluorescenčními barvami, takže možná trizomie může být identifikována přítomností tří místo dvou homologních řetězců chromozomu . U rakoviny žaludku a prsu lze pomocí testu FISH zkontrolovat, zda nádor obsahuje více než dvě kopie genu HER2 / neu (receptor lidského epidermálního růstového faktoru), což má důsledky pro typ chemoterapie. V případě chronické lymfocytární leukémie lze nejčastější chromozomální posuny v určitých genech stanovit pomocí několika FISH testovacích analýz ve vzorcích z kostní dřeně a periferní krve, což má také vliv na terapii.

Funkce, účinek a cíle

Chromozomy v izolovaných buněčných jádrech jsou vyrobeny tak, aby rozdělily svou strukturu dvojité spirály pomocí speciálního chemického ošetření nebo působením tepla, a chromozomově specifické DNA sondy s příslušnou komplementární sekvencí DNA se spojují s „jejich“ specifickými chromozomy. Sondy DNA jsou označeny různými barevnými fluorescenčními barvami, takže je možné rozlišit označené chromozomy pomocí speciálního softwaru a spočítat v automatizovaném procesu.

Jsou známy z. B. Trisomie, ve kterých jsou tři chromozomové řetězce pro jeden chromozom místo tří. Jsou známy také tzv. Monosomy, ve kterých je pouze jeden řetězec chromozomu X a tři nebo čtyři homologní řetězce všech chromozomů. Nejdůležitější změny chromozomu, které lze detekovat pomocí testu FISH v prenatální diagnostice, jsou Ullrich Turnerův syndrom (monosomie X), syndrom trojitého X (trisomie nebo polysomie X), Klinefelterův syndrom, ve kterém ve všech nebo některé somatické buňky u chlapců mají další X chromozom (XXY místo XY), Downův syndrom (trisomie 21), Edwardsův syndrom (trizomie 18) a Patauův syndrom (trizomie 13).

Monosomie X, ve které dívky mají pouze jeden chromozom X, je obvykle fatální, což znamená, že přibližně v 98% případů vede k potratu během prvních tří měsíců těhotenství. V případě, že k narození přesto dojde, mají dívky normální délku života, mají průměrnou inteligenci, ale často trpí množstvím malformací vnitřních orgánů a jsou obvykle sterilní. Syndrom trojitého X s chromozomovou sadou XXX) postihuje pouze dívky. Je možné normální těhotenství a porod.

Většinou vysoké ženy s trojitým chromozomem X mohou normálně žít a obvykle nevykazují žádné fyzické abnormality, potíže s učením však nejsou neobvyklé a vyskytují se problémy s jemnými motorickými dovednostmi. Klinefelterův syndrom, který může ovlivnit pouze chlapce a muže, je charakterizován dalším chromozomem X, který je přítomen ve všech buňkách těla nebo jen částečně. Fyzikální vlastnosti jsou nadprůměrně vysoké s neobvykle dlouhými pažemi a nohama. Klinefelterův syndrom obvykle vede ke sníženému růstu varlat se sníženým uvolňováním testosteronu.

Downův syndrom, synonymem pro trizomii 21, je většinou spojen s určitými fyzickými charakteristikami a kognitivními poruchami. Existují různé formy trizomie 21, z nichž přibližně 95% případů převládá tzv. Trizomie 21. Trizomie 18 (Edwardsův syndrom) ve většině případů způsobuje potrat, je spojena s řadou fyzických rysů a délka života je jen několik dní. Trizomie 13 (Pätauův syndrom) je také charakterizována velkým množstvím fyzických rysů a nežádoucím vývojem, které často vedou k potratům nebo mrtvě narozeným. Délka života u dětí v termínu je jen několik let.

Cílem prenatálního testu FISH je odhalit známé chromozomální abnormality v raném stádiu, aby se rodičům nabídla alternativa legálního potratu, která dítě přenese. U rakoviny prsu a jater lze karcinomy zkontrolovat na zvýšený počet genu HER2 / neu pomocí testu FISH. V pozitivním případě dochází ke zvýšené tvorbě receptorů růstových faktorů, které reagují na určité chemoterapie. K dispozici jsou také testy FISH k identifikaci specifických genetických abnormalit u chronické lymfocytární leukémie (CLL), které zlepšují složení účinných látek chemoterapie.

Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí

Samotný test FISH není spojen s žádnými riziky nebo nebezpečími. Pouze extrakce buněk, které mají být vyšetřeny biopsií nebo vzorkováním plodové vody (amniocentéza), je spojena s malým rizikem infekce v důsledku jejich invazivního charakteru. Zvláštností je, že FISH test může odhalit některé specifické chromozomální defekty, ale není jisté, že v případě negativního výsledku neexistují chromozomální aberace, protože ne všechny anomálie mohou být detekovány FISH testem. V případě pozitivního výsledku testu by měly být provedeny další diagnostické postupy, aby se výsledek potvrdil nebo odmítl jako nesprávný.