Screening aneuploidie

Screening aneuploidie se používá ke stanovení numerických aberací chromozomů v embryích generovaných in vitro, které jsou určeny k implantaci. Jedná se o cytogenetické vyšetření, při kterém lze určit pouze numerické aberace určitých chromozomů. Screening aneuploidie je tedy formou předimplantační diagnostiky (PGD).

Co je to aneuploidní screening?

Termín aneuploidní screening se používá k shrnutí cytogenetických vyšetřovacích metod, které mohou poskytnout indikaci numerických aberací v určitých chromozomech při oplodnění in vitro (IVF). Screening aneuploidie může v zásadě poskytnout indikace nullosomie, monosomie a polysomie, jako je B. dát trizomii.

V nullosomii chromozomový pár zcela chybí, v monosomii chybí jeden homologní chromozom chromozomového páru a v polysomii existují více než dva homologní chromozomy pro konkrétní chromozomový pár. Nejslavnější polysomie je trizomie 21, která vede k Downova syndromu. Protože většina numerických chromozomových aberací - zejména monosomií - je smrtelná, tj. Vede k přirozeným ukončením, potratům nebo mrtvě narozeným zvířatům, jsou do dělohy implantovány pouze embrya bez rozpoznatelných chromozomálních aberací.

To by mělo zlepšit úspěšnost IVF, ale některé chromozomové aberace nejsou nutně fatální, ale vedou k abnormalitám a závažným omezením v pozdějším životě, jako je Downův nebo Turnerův syndrom. Z tohoto důvodu mají některé země z etických důvodů obecný zákaz nebo přísná omezení tohoto typu předimplantační diagnostiky (PGD).

Funkce, účinek a cíle

Screening aneuploidie se používá pouze pro oplodnění in vitro. Nejdůležitějším cílem je přenášet embrya bez rozpoznatelných chromozomových aberací do dělohy, aby se dosáhlo nejvyšší možné šance na úspěch těhotenství s umělou inseminací. V zásadě lze rozlišovat mezi dvěma metodami diagnostiky polárního těla a vyšetřením preimplantačního embrya. První metoda zahrnuje zkoumání polárních těl vaječné buňky, která dosud nebyla oplodněna.

Zde se kontroluje pouze možná aneuploidie vaječných buněk. Děje se tak za předpokladu, že přibližně 90% aneuploidií je mateřského původu. Nejedná se o PGD v užším smyslu, nýbrž o prefertilizační diagnózu, protože nedošlo k oplodnění, tj. K žádné fúzi vajíčka se spermatickou buňkou. Screening aneuploidie na předimplantačním embryu v rané fázi blastuly je naproti tomu kvalifikován jako PGD, protože vyšetření se týká „skutečného“ embryonálního stádia - i když je velmi rané stádium, jen několik dní staré.

V diagnostice polárních těl jsou dvě polární těla, která vajíčka tvoří během první a druhé meiózy, než se sloučí se spermatickou buňkou, odstraněna a vyšetřena na aneuploidii. K určení jakékoli aneuploidie, která může být přítomna, se používá tzv. FISH test (fluorescenční in situ hybridizace). Doposud FISH test umožňoval pouze vyšetřování chromozomů 13, 16, 18, 21, 22 a pohlavních chromozomů X a Y. Chromozomy struktury dvojité šroubovice se rozdělily po meióze a připojily se k příslušné komplementární sekvenci DNA pomocí chromosomově specifických DNA sond.

Sondy DNA jsou označeny různými fluorescenčními barvami. Homologní chromozomy lze spočítat pod světelným mikroskopem v poloautomatickém procesu, takže lze identifikovat numerické aberace. Analogicky k diagnostice polárního těla se provádí aneuploidní screening na embryích před implantací, která jsou stále v rané fázi blastomerů. Nyní se však zabýváme diploidními sadami chromozomů, jejichž dvojitá spirála se musí nejprve rozdělit, aby se zahájilo spojení chromozomů s komplementárními sondami DNA.

Cílem screeningu aneuploidie u obou metod zůstává pozitivní výběr in vitro oplodněných vajíčkových buněk před jejich přenesením do dělohy, aby se dosáhlo nejvyšší možné míry úspěšnosti pro požadované těhotenství. Mnohem diskutovaný etický problém vyvstává z negativního výběru, který je automaticky spojen s pozitivním výběrem a který někteří extrémní kritici rádi používají argumenty, aby se přiblížili eutanazii. Dalším etickým problémem je použití IVF k vytvoření tzv. Záchranného dítěte. Pozitivní výběr embryí generovaných in vitro lze použít k kultivaci všemocných imunokompatibilních kmenových buněk, které mohou díky implantaci zachránit životy sourozenců s určitými chorobami.

Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí

Samotný screening aneuploidie, jakož i extrakce buněčných jader, která mají být vyšetřena, probíhají mimo tělo, a proto nepředstavují žádná přímá rizika ani nebezpečí pro zdraví, a proto je bez vedlejších účinků. Skutečná rizika a nebezpečí spočívají ve skutečnosti, že dosud nebyl dosažen přínos screeningu anoiploidií na blastomerech, tj. Na embryích před implantací, pro zvýšení míry úspěšnosti s ohledem na požadované těhotenství.

Obecně se objevují systémové problémy v důsledku přehnaných očekávání přesnosti výsledků screeningu. To platí pro pozitivní i negativní výsledek. Pozitivní výsledek, tj. Byla nalezena alespoň jedna chromozomální aberace, je spojen s určitou nejistotou. Může se stát, že pozitivní výsledek nesprávně vylučuje transplantaci odpovídající vaječné buňky, i když ve skutečnosti nedochází k žádné chromozomové vadě. Tento typ chybné diagnózy je méně způsoben samotným postupem než skutečností, že embrya ve stadiu blastuly mohou mít několik buněk s chromozomovými aberacemi.

Na druhé straně si budoucí rodiče dítěte IVF nesmí být jisti, že pokud je aneuploidní test negativní, ve skutečnosti neexistuje chromozomální aberace. Další nebezpečí vzniká, když je z embrya odstraněn potřebný počet buněk. Stává se, že buňky odebrané biopsií umírají a nemohou být dále vyšetřovány. Protože biopsie již nemůže být opakována na stejném embryu, není již k dispozici pro transplantaci, protože neexistuje žádný výsledek testu. Je také diskutováno, do jaké míry biopsie ovlivňuje plodnost embrya, takže je ovlivněna celková úspěšnost těhotenství.