Coombsův test

Z Coombsův test detekuje protilátky proti erytrocytům v séru pacienta a používá se například standardizovaným způsobem v rámci péče o mateřství a stanovení krevních skupin. Zkušební postup pracuje s králičím sérem a existuje v přímé a nepřímé formě, která se používá pro různé otázky.

Co je Coombsův test?

K detekci protilátek proti erytrocytům se používá tzv. Coombsův test. Test detekuje protilátky třídy IgG. Tyto protilátky jsou považovány za „nekompletní“ protilátky a nemohou způsobit, aby se krevní buňky slepily. Avšak vzhledem k pentamerové struktuře mohou IgM protilátky indukovat takovou vazbu, a proto se nazývají "kompletní" protilátky.

V Coombsově testu se k detekci protilátek používá tzv. Coombsovo sérum, které je také známé jako antihuman globulin. Sérum Coombs se skládá z krevního séra králíků, kteří byli imunizováni proti lidským protilátkám třídy IgG. Zkouška se provádí buď ve zkumavce nebo jako součást aglutinace mikrokolony. Coombsův test se vrací k Cambridge patologovi Coombsovi a používá se hlavně v hematologii k diagnostice hemolytické anémie. Tyto anémie mohou ovlivnit například novorozence s Rh nekompatibilitou.

V transfuzní medicíně se test používá také pro testy sérologické tolerance. Pojem Coombsův test se v zásadě týká pouze vyšetřovací techniky a tedy použití anti-lidského globulinu. V textovém postupu se rozlišuje přímá a nepřímá forma.

Funkce, účinek a cíle

Přímý Coombsův test detekuje IgG, který se drží erytrocytů. V rámci testu se erytrocyty odebírají z krve pacienta a uvolňují se z plazmy. Zkoušející je poté přidá do Coombsova séra a inkubuje je tímto způsobem.

Pokud krev obsahuje protilátky proti erytrocytům a tyto protilátky jsou vázány na erytrocyty, sérum Coombs a jeho protilátky se vážou na lidský IgG testovaného vzorku. S přídavkem látky zvyšující reakci dochází k aglutinaci a test je vyhodnocen jako pozitivní. Nepřímý test Coombs funguje trochu jinak. Tento test se skládá ze dvou kroků a detekuje protilátky proti cizím červeným krvinkám. Tyto protilátky volně cirkulují ve vzorku krve a nejsou vázány na erytrocyty. Prvním krokem nepřímého testu je inkubace vzorku krevní plazmy s testovanými erytrocyty.

Pokud jsou v testovaném séru přítomny protilátky, vážou se na erytrocyty, ačkoli nedochází k adhezi. Ve druhém kroku se Coombsovo sérum smíchá s testovanými erytrocyty a slepí se spolu. Například pomocí pozitivního nepřímého Coombsova testu lze nekompatibilitu rhesus prokázat dokumentováním neúplných protilátek v mateřské krvi.

Přímý Coombsův test existuje pouze ve výše popsané variantě, a proto je vždy zaměřen na detekci nebo vyloučení zátěže protilátky na erytrocyty pacienta.

Nepřímý Coombsův test je spojen s různými formami použití, které obvykle odpovídají testu na protilátky nebo testu sérologické tolerance. Nepřímý test se však může také použít v souvislosti s dalšími zkouškami a potom se použije například ke stanovení různých protilátkových specificit. Zkušební metoda nepřímého testu zůstává stejná, ale jeho název se může v jednotlivých případech lišit s otázkou testu. Z tohoto důvodu nelze od laboratoře požadovat nepřímý Coombsův test, ale musí specifikovat účel nebo cíl testu.

Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí

S Coombsovým testem je obecně spojeno málo rizik nebo nežádoucích účinků. Odběr krve může být pro pacienta nepříjemný. Možné je i modření. Tyto časy však během několika dnů ustupují.

Někteří lidé se cítí unavení, jsou nemocní nebo mají bolesti hlavy, když mají krev odebranou. Tyto příznaky zpravidla netrvají déle, ale spíše v ten samý den. V každém případě se pacientovi odebere relativně málo krve pro test, takže vedlejší účinky se vyskytují pouze ve velmi vzácných případech. Coombsův test nevyžaduje lůžkovou péči, ale lze jej provádět ambulantně. Doba, po kterou laboratoř trvá, závisí na typu zkušební metody a účelu zkoušky.

Test má zvláštní klinický význam v případě autoimunitní hemolytické anémie, u níž vlastní protilátky imunitního systému způsobují hemolýzu erytrocytů, což vede k anémii. Přímý Coombsův test je obvykle pozitivní na taková onemocnění. To umožňuje lékaři provést relativně spolehlivou diagnózu pacienta po pozitivním testu. Situace je jiná, pokud je test negativní. Negativní přímý Coombsův test nutně neznamená, že je nemoc vyloučena. Existuje také Coombs-negativní varianta autoimunitní hemolytické anémie. V takovém případě musí pacient s negativním testem podstoupit další diagnostické postupy.

V případě popsané choroby patří například stanovení autoprotilátek nebo diagnostika prostředí k další diagnostice po negativním testu. Ve spojení s jinými chorobami lze negativní Coombsův test určitě považovat za vyloučení. Za určitých okolností může po určitých otázkách po pozitivním Coombsově testu následovat další vyšetření, která umožní přesnější klasifikaci přítomného jevu nebo dodatečně potvrdí pozitivní výsledky testu. Indikace pro Coombsův test zahrnují krevní skupiny, krevní transfuze, péči o mateřství nebo podezření na nekompatibilitu Rh.